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miRNA 是較小(約 22 bp)的高度保守非編碼 RNA,在每種細(xì)胞類型中進(jìn)行內(nèi)源性表達(dá)。它通過堿基對互補(bǔ)使靶轉(zhuǎn)錄本沉默,從而起到基因表達(dá)關(guān)鍵調(diào)控因子的作用。許多研究表明miRNAs的表達(dá)譜與疾病息息相關(guān),且可穩(wěn)定的存在于多種體液(包括血液、唾液和尿液),出于這些原因,miRNA 作為非侵入性生物標(biāo)志物成為了包括癌癥在內(nèi)幾乎所有人類疾病的理想候選生物標(biāo)志物。
乳腺癌是女性最常見的癌癥之一,醫(yī)學(xué)技術(shù)發(fā)展到今天,可以說很多乳腺癌都可以被治愈,但三陰性乳腺癌患者的治療和生存不容樂觀。很難治療,因此迫切需要找到相關(guān)的生物標(biāo)志物來實現(xiàn)對該疾病的早期檢測。研究表明5 個 miRNA 的表達(dá)譜(miR-92a-3p、miR-342-3p、miR-16、miR-21 和 miR-199a-5p)可以有效區(qū)分 TNBC 和非 TNBC,有望在將來用于 TNBC 的診斷。
基于這些前期研究,海南醫(yī)學(xué)院呂卓璇研究員聯(lián)合碧芯生物共同開發(fā)了高通量檢測三陰性乳腺癌相關(guān)miRNAs表達(dá)的方法。其原理主要是將等溫擴(kuò)增中的滾環(huán)擴(kuò)增技術(shù)與懸浮芯片(磁性熒光編碼微球)相結(jié)合,具體研究步驟如圖1所示,首先將與TNBC相關(guān)的miRNA反轉(zhuǎn)成cDNA,然后再通過其對應(yīng)的連接引物連接成環(huán);連接再不同熒光編碼微球上的特異性的引物會與DNA環(huán)互補(bǔ)配對,對成環(huán)產(chǎn)物進(jìn)行滾環(huán)擴(kuò)增;最后通過流式細(xì)胞儀檢測編碼微球和擴(kuò)增產(chǎn)物(采用熒光標(biāo)記的dUTP)的熒光標(biāo)記信號確定待測RNA樣本的miRNA的類別和表達(dá)水平。
該篇文章“High-throughput quantitative detection of triple-negative breast cancer-associated expressed miRNAs by rolling circle amplification on fluorescence-encoded microspheres" 近期發(fā)表于在Chinese Chemical Letters (CCL)(2022年中科院分區(qū)1區(qū), IF= 8.455)。
碧芯生物是一家專業(yè)從事低吸附磁性熒光編碼微球自主研發(fā)以及流式細(xì)胞法檢測多重蛋白試劑盒開發(fā)的生物高科技企業(yè)。公司是由在生物、材料、醫(yī)學(xué)等多學(xué)科領(lǐng)域有著扎實研究基礎(chǔ)和豐富實驗經(jīng)驗的博士團(tuán)隊組成?,F(xiàn)已開發(fā)70種低吸附磁性熒光編碼微球,并在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步研發(fā)出可靈活組合的多細(xì)胞因子檢測試劑盒,包括小鼠多細(xì)胞因子檢測試劑盒(IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17A、IL-12p70、IL-1β,MCP-1、IFN-γ、TNF-α)和人類多細(xì)胞因子檢測試劑盒(IL-1β、IL-2、IL-4、IL-5、IL-8、IL-6、IL-10、IL-12p70、IL-17A、TNF-α、IFN-γ、IFN-α2)。這些細(xì)胞因子的檢測可根據(jù)實際需要進(jìn)行自組合搭配,滿足客戶多樣化應(yīng)用場景的需求。
新的學(xué)期又要開始了,碧芯生物將提供更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和服務(wù),祝愿各位老師取得更多更好的科研成果。
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